Seminario 2 Biología Celular, Sebastián Giusti

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Biología y Genética 1 UA

Күн бұрын

Пікірлер: 27

@florenciatorres8 2 жыл бұрын

Lo bien que explica el profesor, me hizo la clase re simple. Un genio.

@liliumfra Жыл бұрын

🎯 Key Takeaways for quick navigation: 00:00 🎯 El seminario aborda la técnica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), ampliamente utilizada en ciencias biomédicas y químicas. 01:17 🩺 La PCR ha sido crucial en el diagnóstico de la infección aguda por el virus responsable de la enfermedad respiratoria aguda, como en el contexto de la pandemia de COVID-19. 04:22 🔬 La PCR fue desarrollada por el bioquímico Carl Mullis como una técnica que permite amplificar un segmento específico de ADN a partir de una mezcla compleja, clonando el material genómico. 06:27 🧬 Para replicar ácidos nucleicos fuera de las células, es necesario comprender el mecanismo de replicación de ácidos nucleicos en el contexto intracelular. 11:21 ⚠️ La ADN polimerasa requiere un molde de ADN cadena simple y un extremo 3' hidroxilo libre para elongar y sintetizar una nueva cadena. 14:28 🧬 Las dos hebras de ADN que componen el ADN son antiparalelas, lo que significa que tienen polaridades opuestas y extremos 5' y 3' diferentes. 18:08 🧬 Las hebras de primer más observadores (oligonucleótidos) actúan como moldes para la ADN polimerasa y tienen extremos 3' hidroxilo libres para iniciar la síntesis de la nueva cadena de ADN. 20:42 🧬 Los nucleótidos del ADN tienen grupos fosfato en el extremo 5' y grupos hidroxilo en el extremo 3', lo que permite la polimerización. 23:12 🧪 Para realizar la PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa), se necesita ADN molde, primers, nucleótidos, ADN polimerasa y fragmentos cortos de ADN. 26:11 🔍 La especificidad de la amplificación en la PCR está determinada por el diseño de los primers, que deben ser complementarios a la región que se quiere amplificar. 30:13 🔬 El magnesio se utiliza como cofactor para que la ADN polimerasa adquiera su forma tridimensional y sea activa. 32:12 🔄 La PCR se realiza en ciclos, cada uno con tres pasos: desnaturalización, hibridación de primers y síntesis de ADN, lo que amplifica selectivamente la región de interés. 39:48 🌡️ El uso de termocicladores permite controlar las variaciones de temperatura necesarias en cada ciclo de la PCR, evitando la desnaturalización de las polimerasas. 39:59 👩‍🔬 La ADN polimerasa utilizada en la PCR es termo resistente, proviene de una bacteria extremófila llamada *Thermus aquaticus*, lo que le permite sobrevivir a las altas temperaturas del proceso sin desnaturalizarse. 43:52 🔄 Cada ciclo de la PCR consiste en tres pasos: desnaturalización, alineamiento de primers y síntesis de ADN. La duración de cada paso puede variar, pero un ciclo completo suele durar entre 1.5 y 2 horas. 52:07 🧬 La amplificación de la PCR es exponencial y acumula rápidamente copias del fragmento de ADN deseado. En cada ciclo, el número de copias se duplica, lo que lleva a una explosión de acumulación de productos. 56:00 📈 Teóricamente, la amplificación de PCR sería infinita, pero en la práctica, la acumulación de productos se hace más lenta con el tiempo. Se llega a una meseta o plato donde ya no hay más amplificación debido a la escasez de reactivos y el agotamiento del molde. 59:26 🧬 La velocidad de la reacción de PCR disminuye debido a la limitación de moldes y sustratos, lo que resulta en una meseta o plateau en la amplificación exponencial. 01:00:07 🧪 La reacción de PCR es exponencial al principio porque la velocidad de acumulación de productos depende del número de moldes (ADN) presentes, y en cada ciclo se generan más moldes. 01:02:42 📊 La visualización de los productos de PCR se realiza mediante técnicas de electroforesis en gel de agarosa, separando los fragmentos de ADN por su tamaño. 01:09:24 🌈 La técnica de electroforesis en gel se utiliza para separar físicamente moléculas de ADN de distintos tamaños, que son visualizadas mediante bromuro de etidio y luz ultravioleta. 01:14:18 🔍 La intensidad de las bandas en la electroforesis refleja la cantidad de ADN presente en cada una, pero en aplicaciones clínicas, lo más relevante es determinar la presencia o ausencia de un producto de amplificación, indicando la presencia o no de un agente infeccioso. 01:18:03 🧬 La técnica PCR puede utilizarse para diagnosticar mutaciones en el genoma mediante la detección de distintos tamaños de productos de amplificación en un electroforesis en gel. 01:23:08 📊 La PCR en tiempo real permite visualizar la acumulación de productos de amplificación en cada ciclo de PCR, lo que proporciona información cuantitativa sobre la cantidad inicial de molde en la muestra. 01:26:27 💡 La PCR cuantitativa en tiempo real utiliza agentes fluorescentes sensibles que se acumulan con el producto de amplificación, y la intensidad de fluorescencia en el ciclo umbral (ciclo 7) permite distinguir muestras con diferentes cantidades iniciales de molde. 01:29:05 📈 Las muestras con mayor cantidad inicial de molde se amplificarán en ciclos más tempranos, mientras que las muestras con menor cantidad de molde tardarán más en alcanzar el ciclo umbral de amplificación exponencial en la PCR cuantitativa. 01:33:33 👥 Se presentan dos variantes de la PCR: la PCR punto final (análisis posterior con electroforesis) y la PCR en tiempo real (monitoreo cuantitativo de la amplificación en cada ciclo). 01:35:10 ⚙️ La PCR cuantitativa de transcripción inversa (RT-PCR) es una técnica que permite detectar y amplificar específicamente ácido ribonucleico (ARN) a partir de muestras biológicas, al convertir previamente el ARN en ADN mediante una retrotranscripción. 01:35:50 🔬 La retrotranscripción es una técnica que permite convertir moléculas de ARN en copias de ADN para amplificar segmentos específicos de ácidos nucleicos, como en la RT-PCR. 01:37:01 🧬 La RT-PCR es una variante de la PCR que utiliza la retrotranscripción para amplificar ADN copiado de ARN, permitiendo detectar la presencia de virus como el SARS-CoV-2 y VIH en muestras biológicas. 01:38:45 💡 La RT-PCR cuantitativa monitorea la amplificación de ácidos nucleicos en tiempo real y se emplea para diagnosticar infecciones virales como el COVID-19. 01:41:18 🔍 Se han abordado los mecanismos moleculares de la polimerización de ácidos nucleicos, cómo se seleccionan los primers y la visualización de los productos de amplificación. 01:46:06 🦠 La retrotranscripción es esencial para la detección de ARN en la RT-PCR, ya que las ADN polimerasas no pueden sintetizar ADN a partir de ARN directamente. 01:48:00 ⚠️ Los falsos negativos en PCR pueden deberse a errores técnicos en el procesamiento de muestras, y se resuelven mediante controles y protocolos adecuados. Made with HARPA AI

@ritabulla7996 Жыл бұрын

gracias amigo!

@arissakudo154 4 ай бұрын

Genio!

@NataliaClaudio-xp4gf 8 ай бұрын

GRACIAS POR LA ACLARACIÓN DE LAS "PRIMAS" DE LOS CARBONOS! PORQUE MUCHOS LO PASAN POR ALTO,COMO SI FUESE ALGO OBVIO,Y NO LO ES! (MINUTO 20)

@IsaLana-o5l 4 ай бұрын

🎯 Key points for quick navigation: La técnica de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es fundamental en biología celular y biomédica. La PCR permite amplificar y clonar segmentos específicos de ADN. Para que la PCR ocurra, se necesitan componentes como ADN molde, enzimas de polimerasa, nucleótidos, y fragmentos de ADN in vitro. Las ADN polimerasas requieren un molde de ADN de cadena simple con un extremo 3' hidroxilo libre para iniciar la polimerización. La especificidad de amplificar una región específica de ADN en la PCR radica en el diseño de los primers complementarios a esa región. Es indispensable que en la PCR se diseñen dos primers diferentes, uno para cada hebra de ADN, para que funcionen como moldes y permitan la polimerización. Es necesario conocer la secuencia que se quiere amplificar para diseñar primers específicos. Los primers se diseñan para unirse a regiones específicas del ADN para dar especificidad a la reacción de PCR. La PCR se lleva a cabo en ciclos de amplificación con tres pasos: desnaturalización, hibridación y síntesis de ADN. La temperatura cambia en cada paso para favorecer la unión de primers y la síntesis de ADN. La ADN polimerasa utilizada en PCR proviene de una bacteria termófila resistente a altas temperaturas. Cada ciclo de PCR dura entre una hora y media y dos horas, con pasos cortos de desnaturalización, hibridación y síntesis de ADN. La amplificación en PCR es un proceso exponencial que aumenta la cantidad de copias de un fragmento específico de ADN en cada ciclo. Después de 30 ciclos de PCR, se pueden obtener alrededor de mil millones de copias del producto deseado. La acumulación de productos en PCR es explosiva y en los últimos ciclos se obtiene un producto purificado. La reacción de PCR genera una cantidad exponencial de copias de ADN con cada ciclo, pero en la realidad se llega a una meseta debido a limitantes. La electroforesis en gel de agarosa separa moléculas de ADN según tamaño, permitiendo visualizar y analizar los productos de PCR. La intensidad de las bandas en la electroforesis representa la cantidad de ADN, pero en aplicaciones clínicas la presencia de un producto de amplificación es más importante que su intensidad. La PCR se utiliza en diagnósticos clínicos para detectar la presencia o ausencia de agentes infecciosos, mutaciones genéticas, entre otros. La electroforesis en gel no solo confirma la presencia de amplificación de ADN, sino también permite determinar el tamaño de los productos amplificados. La técnica de PCR en tiempo real permite una dimensión cuantitativa al monitorear la acumulación de productos de amplificación en cada ciclo. La técnica de RT-PCR se utiliza para detectar ácidos nucleicos de ARN convirtiéndolos en ADN para luego amplificarlos. La RT-PCR es útil para el diagnóstico de infecciones virales con genomas de ARN, ya que la polimerasa de ADN no puede amplificar directamente el ARN. 01:47:06 *Virus de genoma en formato ARN pueden ser agentes infecciosos en muestras humanas.* 01:48:00 *Un falso negativo en una PCR cuantitativa podría ser una muestra con curva plana que no amplificó.* 01:49:15 *Un falso negativo puede ser resultado de un error técnico en el procesamiento de la muestra, como un hisopado mal realizado.* Made with HARPA AI

@starkz7788 2 жыл бұрын

Este profe es lo máximo, capo total

@silenagomezbriner729 2 жыл бұрын

excelente, estaba completamente perdida y pude entender todo! un genio gracias

@mayidgustavojaldinfernande9918 7 ай бұрын

Increíble profe . Estupendo trabajo.

@florenciacabo2313 2 жыл бұрын

Excelente explicación del profe

@ramirobiglieri7308 2 жыл бұрын

Se entendió todo, gracias por la explicación profe.

@marcospaulodonascimento8323 2 жыл бұрын

Como siempre impecable!

@benjaminlujan1708 2 жыл бұрын

lo amo profe, muchas gracias!

@brianmercado5176 Жыл бұрын

buen profe, el audio es malísimo, ojala se pueda solucionar eso

@martinaarrutti4806 8 ай бұрын

este profe es lo máximo

@shirleyanaliazaracho5156 2 жыл бұрын

Hola, una pregunta, dónde podemos ver los seminarios que expone el profe? Gracias! Excelente clase.

@CarlosFabrizzioAyala 7 ай бұрын

Muy buena expilcación. gracias

@Marcos-ux8mh 8 ай бұрын

excelente el video!!!

@fiammaarduino 2 жыл бұрын

Hola, tengo una duda, los ciclos de amplificación suceden todos en el mismo lugar ? Y es a la vez o es uno detrás de otro? gracias

@carolinaord 2 жыл бұрын

Los ciclos de amplificación suceden uno detrás de otro porque los moldes de un ciclo son sintetizados en el ciclo anterior. En el primer ciclo se usan los moldes originales, en el segundo ciclo se usan los moldes originales + los moldes sintetizados en el primer ciclo y así sucesivamente (por eso se dice que la amplificación es exponencial).

@leilarios1806 2 жыл бұрын

Hola, me encanto la explicacion pero lo unico que no entendi fue como darme cuenta si un resultado es positivo o negativo en una PCR en tiempo real. Desde ya gracias.

@starkz7788 2 жыл бұрын

eso te lo explicaban en el trabajo practico

@yamilafermin519 7 ай бұрын

@@starkz7788en mi clase se pusieron hablar del vih usjsejshhs

@lucianoluissnchzdeleon9101 2 жыл бұрын

ME GUSTARIA SABER LA RESPUESTA DE ESTE BUEN PROFESOR ,UNA RESPUESTA SOBRE LAS VACUNAS DE COV 19,¿SON BUENAS O MALAS ESAS VACUNAS K LES OBLIGARON A PONERSE A LAS GENTES ???