Aprenda os fundamentos do sequenciamento Sanger

[@v1n1ssl]

Nossa, que aula perfeita!! Muito obrigado!!

[@matheusgalhardo2287]

O pai da BioMol na atualidade, que aula incrível

[@fgrocheviski]

Super simples de entender com essa explicação, obrigado

[@kevinbarbosa11]

Que aula perfeita! Essas aulas estão tirando muitas dúvidas que eu tinha. Faço sequenciamento há 2 anos e existiam (ainda existem) algumas lacunas que estão sendo preenchidas com essas aulas. Deveriam existir mais pessoas assim como você em diferentes áreas do conhecimento. Está de parabéns! 👏🏻

[@flaviogalvaoribeiro5373]

O sequenciamento Sanger possui algumas limitações, uma delas, é a incapacidade de detectar grandes deleções, e portanto, é necessário a utilização de técnicas complementares (como o MLPA) para auxiliar na detecção de tais alterações.

[@tadeusantos1102]

Essas deleções seriam alterações que levam antes da síntese do segmento exon de DNA ? , Pq algumas doenças como hemofilia, o diagnóstico por meio do PCR, não consegue detectar algumas deleções ou alterações do sítio de clivagem do segmento intron. Muitas vezes sabemos que esse tipo de segmento está associado a 1.5 % de doenças genéticas. Isso explica o fato do câncer ou outras doenças de caráter gênico serem muitos difíceis de ter uma possível cura em si ?

[@Chemical-Lab]

Parabéns pela aula. Muito boa! Sou da área de química e trabalho com eletroforese capilar, não há dúvidas de que o tema foi muito bem explicado aqui. Abs,

[@UniversodaBioMol]

Valeu!! muito obrigado!

[@arianepauluci2538]

Aulas incríveis! Parabéns! Excelente didática com muito objetivo e imagens que agregam muito ao ensino, estou maratonando

[@sorayasilvaandrade1150]

Um espetáculo a sua aula. Parabéns, você resume sem omitir informações importantes. Obrigada por difundir conhecimentos.

[@claratoledo4795]

Que aula incrível, super simples e bem explicada...aprendi muito em 30 minutos muito mais que em 1 hora de aula...Amei!!!!

[@rafaelacamargobaggio5330]

muito muito muito muito bom, obrigadaaaaa

[@iaradinik7306]

Parabéns pela aula! Como sugestão, por favor, faça uma aula sobre CRISPR? Obrigada

[@UniversodaBioMol]

Com certeza! 😉

[@esdrasramosbarbosa4457]

Eu também queria uma aula dessa também

[@karinaomairi3831]

Parabéns! Aula genial!

[@igorbuzzatto]

Muito bom poder revisar este conteúdo.

[@leallljunior5248]

Excelente explicação.

[@Professor_Caju]

Completão, parabéns!

[@juisoares1156]

Muito boa a aula, simples explicação e bem didática.

[@JulioCesar-yx9uo]

Melhor aula de sequenciamento de Sanger, pqp! mto bom! parabéns!

[@amandavieira4639]

Eduardo como sempre com uma didática incrível, parabéns!!

[@nathaliavilela8788]

obrigada!!!! finalmente entendi

[@achatadaana]

Usando o vídeo para estudar pra seleção de doutorado!!! Muito obrigada, excelente aula!

[@taynaaguiar8293]

uau, que aula perfeita, juro! a didática, os desenhos, obrigada por esclarecer minhas dúvidas!!!!

[@daniboaventura4320]

Que canal fantástico. Obrigada!

[@emanuelfelipe921]

Parabéns pela aula professor, está me trazendo um encanto sobre biomol. SUCESSO!

[@wisleymoraes9030]

Parabéns pela clareza, muito boa a aula. Obrigada!

[@liviaejoselia5183]

Muito legal! Adorei

[@cassiapereira2795]

Muito boa!

[@tainalima6439]

Parabéns pela aula e muito obrigada!!!!

[@jessicamaciel6797]

Que aula maravilhosaaa! Parabéns, professor!

[@eumesma190]

Excelente aula. Parabéns pela didática!

[@adrianadrika8702]

Que aula maravilhosa! obrigada por me ajudar.

[@KarinaNovais]

Sem palavras, aula maravilhosa.

[@douglasmarcelino5058]

Aula perfeita mesmo! Professor teria como você fazer uma aula de Analise de Metilação do Dna?

[@UniversodaBioMol]

Sugestão anotada! : )

[@Victorsantt]

Aula perfeita. Parabéns, sucesso!

[@ezequianemachado9543]

Adorei aula! Muito obrigada

[@lorenzodepaulavalverde6996]

que aula INCRÍVEL 👏🏻

[@VanessaSancim]

Muita boa aula 🙏🏻

[@canaltestepp]

Vídeo perfeito! Muito obrigada. Melhor vídeo sobre o tema, que vi. Muito bem explicado.

[@henriquedrummond2755]

Se eu não sei a sequência da fita como desenhar o primer?

[@aliciamartim1]

Muito obrigada pelo vídeo! Me ajudou muito!!!!!

[@LudOliveiraBeauty]

Que aula perfeita 💜

[@samanthamagalhaes6656]

Aula sensacional!!

[@denisecastroparente2016]

Parabéns pelo riquíssimo conteúdo

[@aline_stardust]

Que didática!!!! Obrigada!

[@grimizan6724]

Muito boa a aula!

[@lauragomescaldeira3647]

Aula perfeita

[@samanthapaco3790]

Aula fantástica!!!!!!

[@danielehneda137]

Ótima aula❤

[@carolinanascimentodasilva4539]

parabens pela aula

[@wambertoalmeida2355]

Aula topppppppppp! totalmete detalhada. Obrigadooooooo!

[@esdrasramosbarbosa4457]

Aula bem explicada

[@Eh_O_Nico]

Muito bom como sempre brother, parabéns

[@gabssol218]

Perfeito!!!!!!!!!!

[@thalytacazuza5688]

Aula perfeita. Muito obrigada msm!

[@UniversodaBioMol]

Obrigado Thalyta.

[@lusca_michel]

Nossa Professor, muito bom! Obrigado!

[@VitoriaMaria-or8qe]

Parabéns 😃🥳🥳 excelente aula.

[@patricia6293]

Excelente!

[@thiagodecarvalhoreisreis4757]

Parabéns pela aula! Muito esclarecedora

[@samukart]

Ótima aula! Muito obrigado!

[@drielesouza9223]

Ótima aula!

[@brunoambroziogalindo2034]

Eduardo, ótima aula de Sanger Sempre usei o Sanger para sequenciar genes mitocondriais, aí é fácil fazer o contig tem 2 fitas diferentes e são complementares. Mas gostaria de uma dica para Genes Nucleares, como funciona? Pretendo estudar SNP de gene nuclear, então em alguns casos eu posso ter 4 filamentos simples diferentes, no caso de um heterozigoto correto, então na posição onde houver mutação, quando estou sequenciando um dos primers posso ter 2 picos na mesma posição, por exemplo, um C e um T concomitantemente. Na hora de formar o contig o software consegue identificar isto? obrigado e parabéns mais uma vez

[@Luizcarlos-rp4uu]

prof tem vídeos sobre marcadores genéticos aqui? Não achei

[@alineaquino3558]

Parabéns pela clareza e didática nas aulas, sempre muito excelente! Gostaria de saber se você tem alguma aula sobre Single Cell? Desde já agradeço.

[@bellagiselly1]

excelentee!!

[@PedroPaulo-np8bv]

muito bom !!

[@dennysvida1]

Qual programa vc usa para fazer as aulas?

[@vitoriasousa5060]

Aula incrível!

[@wesleytrindade6134]

Sim amiga kkkkkkk

[@giovannevieira1806]

Muito boa mesmo

[@luanacerqueira8435]

Olá! Como operacionalmente, ou seja, na prática, juntamos as duas leituras feitas no sequenciamento (correspondentes aos primers forward e reverse separadamente) em uma só??? Primeiramente como inverter a leitura do primers reverso (fazer o reverso complementar), e em seguida como alinhar as duas leituras (direta e reversa previamente invertida), editando um trecho único, que é o que será usado nas análises, buscas no Genbank, etc. ????

[@gustavomanoel4884]

Não se utiliza dois tipos de primers no sequenciamento Sanger. Se isso fosse feito, para fragmentos de DNA de mesmo tamanho teríamos fluorescências de diferentes cores.

[@sabrinameiradeneiva7063]

Como voce sintetiza o primer caso va fazer um sequenciamente de novo, considerando que voce nao sabe a sequencia?

[@UniversodaBioMol]

Neste tipo de abordagem, os fragmentos desconhecidos são clonados antes do sequenciamento. E os primers são desenhados nas sequências do clone (que são conhecidas) que flanqueiam o fragmento desconhecido.

[@Luis58537]

Cacete, que canal foda!

[@Miriammachadooficial]

Toppp. Obrigada

[@suellenpedrosa4930]

Como se certificar que em todos os nucleotídeos da sequência alvo se inseriu um ddntp para que ele seja identificado nos picos de fluorescência? Por mais que os fragmentos venham de cópias da PCR não é possível que algum passe batido e ao invés de se incorporar um ddntp incorpore um dntp e essa parte da sequência não seja contabilizada no sequenciamento ? Obggg!!

[@deboraroth0604]

Uma duvida... e o primer? como defino a sequencia dele? para o pCR eu amplifico o que eu estou procurando, vou ao geneBank e consigo escolher a sequencia, etc...mas da tecnica de Sanger nao entendi...

[@franciscoliviete477]

A sequência do primer deve ser complementar parte do DNA ao qual ele vai se ligar. Como você sabe a sequência do primer que deve ser usada se você não conhece a sequência do DNA a ser sequenciado? E como você me garante que o primer vai ser adicionado na extremidade da fita e não no meio dela?

[@izabelamorais180]

Então, a importância dos ddNTPs seria gerar fragmentos de varios tamanhos?

[@UniversodaBioMol]

Perfeito. Isso mesmo.

[@isadorapaulinipavan9120]

Muito boa a aula, tem como voce disponibilizar os slides ?

[@ricardobatista1843]

Não respondeu a pergunta que vc fez no final do vídeo. Pq fazer outras técnicas como pcr, se existe o sequenciamento?

[@UniversodaBioMol]

Simplesmente por praticidade e custo. Veja como várias aplicações, antes realizadas por diferentes técnicas, hoje estão migrando para NGS. NGS está ficando cada vez mais fácil de fazer e cada vez mais barato.

[@rebecapeclat1494]

Eu tenho essa dúvida, pq precisamos de outras técnicas se já tem a técnica que sequência o DNA???

[@rfcar]

Eduardo, O tamanho dos picos do cromatograma referente às bases tem a ver com a qualidade da leitura pelo software? Fiquei com essa dúvida. Muito obrigado.

[@stephannydossantosnobre9642]

Ótima aula!! tenho só uma duvida. Se por acaso eu apenas não colocar o Dideoxinucleotideo de timina mas colocar de todo o restante (G,A,C) na hora de gerar o gráfico com fluorescência a maquina irá ignorar esse espaço sem timina e continuará lendo o restante da sequencia? No gel que correu terá as marcações de timina "normais" correto?

[@carlosrobertofonseca420]

Oque faz com que a DNA polimerase use um nucleotídeo modificado e interrompa o processo de adição de novos nucleotídeos ? como ela decide a hora de escolher o nucleotídeo modificado e o não modificado ?

[@danisilva7029]

Acaso.

[@Nordestinamentevivendo]

Acaso, só que como são muitas moléculas, uma hora ela trava e fica tal fragmento, outra hora ela ignora e trava mais na frente, formando outro fragmento. Então a eletroforese separa todos esses fragmentos

[@jenifferlorrayne2589]

É necessário fazer a técnica de PCR seguida da técnica de sequenciamento de Sanger ou só o sequenciamento de Sanger é suficiente?

[@vickvernechio7402]

O sequenciamento geralmente é feito após PCR. O sequenciamento seria o final da técnica, não precisa fazer mais nada depois.

[@emillyaraujo1041]

escrevi e apaguei tantas vezes que desisti kkkkkk fui tapeada

[@ledobler]

Pqp. Entrei nesse vídeo só pra saber qual era o tamanho da onda e a pessoa me diz que "não importa"...( Em 19:10)

[@paulatrevisolbrito6485]

Muito obrigada pela aula impecável, sor!