¿Qué es y cómo funciona la PCR?

[@piratingscience7333]

****REFERENCIAS**** [1] Kleppe K, Ohtsuka E, Kleppe R, Molineux I, Khorana HG «Studies on polynucleotides. XCVI. Repair replications of short synthetic DNA's as catalyzed by DNA polymerases». J. Mol. Biol., 56, 1971, pàg. 341-361. [2] www.nobelprize.org/prizes/chemistry/1993/mullis/lecture/ [3] Joseph Sambrook & David W. Russel (2012). Molecular Cloning: A Laboratory Manual (4rd ed.). Cold Spring Harbor, N.Y.: Cold Spring Harbor Laboratory Press. ISBN 978-1-936113-42-2. Chapter 7: Polymerase Chain Reaction [4] international.neb.com/protocols/0001/01/01/taq-dna-polymerase-with-standard-taq-buffer-m0273 [5] Cai HY, Caswell JL, Prescott JF (March 2014). "Nonculture molecular techniques for diagnosis of bacterial disease in animals: a diagnostic laboratory perspective". Veterinary Pathology. 51 (2): 341-50. [6] James P. Noonan,Graham Coop, Sridhar Kudaravalli, Doug Smith, Johannes Krause, Joe Alessi, Feng Chen, Darren Platt, Svante Pääbo, Jonathan K. Pritchard, Edward M. Rubin «Sequencing and Analysis of Neanderthal Genomic DNA». Nature Medicine, 314, 580, 17-11-2006, pàg. 1113 - 1118. [7] Alonso A, Martín P, Albarrán C, García P, García O, de Simón LF, et al. (January 2004). "Real-Time PCR Designs to Estimate Nuclear and Mitochondrial DNA Copy Number in Forensic and Ancient DNA Studies". Forensic Science International. 139 (2-3): 141-9. [8] Hayden MJ, Nguyen TM, Waterman A, Chalmers KJ (2008). "Multiplex-Ready PCR: A new method for multiplexed SSR and SNP genotyping". BMC Genomics. 9: 80 [9] Don RH, Cox PT, Wainwright BJ, Baker K, Mattick JS (July 1991). "'Touchdown' PCR to circumvent spurious priming during gene amplification". Nucleic Acids Res. 19 (14): 4008 [10] Raoult, D; G Aboudharam; E Crubezy; G Larrouy; B Ludes; M Drancourt (2000-11-07). "Molecular identification by "suicide PCR" of Yersinia pestis as the agent of medieval black death". Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 97 (23): 12800-12803. [11] Venkitaraman AR (April 1989). "Use of modified T7 DNA polymerase (sequenase version 2.0) for oligonucleotide site-directed mutagenesis". Nucleic Acids Research. 17 (8): 3314. [12] Lawyer, F. C.; Stoffel, S.; Saiki, R. K.; Chang, S. Y.; Landre, P. A.; Abramson, R. D.; Gelfand, D. H. (1993). "High-level expression, purification, and enzymatic characterization of full-length Thermus aquaticus DNA polymerase and a truncated form deficient in 5' to 3' exonuclease activity". PCR Methods and Applications. 2 (4): 275-287. [13] Markoulatos, P; Siafakas, N; Moncany, M (2002). "Multiplex polymerase chain reaction: a practical approach". Journal of clinical laboratory analysis. 16 (1): 47-51. [14] Saiki RK, Gelfand DH, Stoffel S, et al. (1988). "Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase". Science. 239 (4839): 487-91

[@enriquevillarig4972]

Grandísimo vídeo que explica de una forma sencilla y tremendamente efectiva el proceso de PCR.

[@piratingscience7333]

Hola Enrique, muchas gracias por tu comentario y me alegro que te haya gustado! :)

[@lavidadebender2572]

GRACIAS. En menos de 5 minutos de vídeo he entendido lo que no ha podido ni sabido explicar mi profesora en varias horas... Te debo una!

[@piratingscience7333]

Muchas gracias por tu comentario!! Son procesos complejos y explicarlos de forma sencilla es complicado asi que me alegra leer que te ha sido de utilidad! :)

[@marcosolorzano7422]

Muy bueno el video, no se por que gente que se lo curra como tú no tiene más visibilidad !!!

[@piratingscience7333]

Muchas gracias Marcos, al final estamos aquí para acercar la ciencia a quien le interesa y hacerla más amena para el publico general! :)

[@aldodelgadillo1258]

Muchas gracias por tu video me ayudo mucho!

[@marianafernandez6891]

Gracias!

[@lauramartinezfrontera679]

Excelente!!!!!

[@na.a2m]

Muy buen video 👌

[@piratingscience7333]

Muchas gracias, me alegro que te haya gustado!!

[@nikicaballero4148]

Mm en la elongación en la imagen el ADN Polimerasa esta sintetizado la cadena de 3' a 5' y no como dice de 5'a 3'

[@piratingscience7333]

Hola Niki, Si te fijas en el video las hebras de ADN son antiparalelas, es decir que las dos cadenas van en direcciones opuestas, las cadenas coloreadas en negro van de 5' a 3' (superior) y de 3' a 5' (inferior). Esta dirección se conserva cuando las dos hebras se separan, por lo tanto, la direccionalidad de la cadena sintetizada es de 5' a 3' por la ADN polimerasa. Entiendo que la orientación de las hebras originales (marcadas en negro en el video) puede generar confusión, pero es crucial tener en cuenta que las nuevas cadenas sintetizadas son antiparalelas y siguen la dirección de 5' a 3', tal como se muestra en la representación, tal vez puedas guiarte por los cebadores y por el inicio de la elongación, ambos se colocan y actúan de 5' a 3'. Espero que esta explicación aclare tu inquietud y profundice tu comprensión sobre el proceso de PCR. Si tienes alguna otra pregunta o comentario, no dudes en compartirlo. Un saludo!

[@MICHELLEAZENETTECALVILLOLOPEZ]

Donde editaste tu video?

[@piratingscience7333]

La edición en sí es en after effects y la ilustraciones están hechas con illustrator. El montado final del video, donde añado la música y los efectos de sonido, se realiza en Premier. Muchas gracias, me alegro que te haya gustado y un saludo!

[@kerencruz9639]

👍