CRISPR-Cas9 perfekt erklärt - Genediting - ein revolutionäre Technologie

Identifizierung des Zielgens: Das fehlerhafte Gen, das für die Lebersche kongenitale Amaurose verantwortlich ist, wird identifiziert.
Entwurf der Leit-RNA: Forscher entwerfen eine gRNA, die komplementär zum Zielgen ist.
Kombination von gRNA und Cas9: Die gRNA wird mit dem Cas9-Enzym kombiniert, um einen aktiven CRISPR-Cas9-Komplex zu bilden.
Einführung des Komplexes in die Zelle: Der CRISPR-Cas9-Komplex wird in die Zellen der Patienten mit LCA eingebracht.
Bindung der gRNA an das Zielgen und Schneiden der DNA durch Cas9 : Die gRNA bindet an das fehlerhafte Gen in den Zellen der Patienten.Das Cas9-Enzym schneidet die DNA an der Zielstelle.
Gene-Editing und Kontrolle:Reparatur der DNA und Beobachtung der Verbesserung der Sehfähigkeit
Quellen: Enzym CAS9 by Von Thomas Splettstoesser, CC BY-SA 4.0
zweite Abbildung von CAS9: commons.wikimedia.org/wiki/Fi...
Uploaded a work by Donohoue, P., Pacesa, M., Lau, E., Vidal, B., Irby, M.J., Nyer, D.B., Rotstein, T., Banh, L., Toh, M.T., Gibson, J., Kohrs, B., Baek, K., Owen, A.L.G., Slorach, E.M., van Overbeek, M., Fuller, C.K., May, A.P., Jinek, M., Cameron, P. from 10.2210/pdb7OX8/pdb

[@hanspozo8563]

Ich habe nicht verstanden, wie die gRNA einerseits komplementär zum Zielgen und andererseits aus einem Repeat und einem Spacer bestehen kann. Was hat das eine mit dem anderen zu tun?

[@bioixi]

Die Begriffe "Repeat" und "Spacer" stammen aus dem ursprünglichen Entdeckungskontext von CRISPR in Bakterien. In der Genom-Editierung wird der "Spacer" in der gRNA so gestaltet, dass er komplementär zum Zielgen im Organismus ist, das modifiziert werden soll. Der "Repeat"-Teil der gRNA ist dabei meistens auf der tracrRNA-Seite zu finden und wird für die Bindung und Aktivierung des Cas-Proteins verwendet. Es ist also ein bisschen eine Umdeutung der ursprünglichen biologischen Rolle von CRISPR.

[@agirlfromjaghori77]

Können Sie mehr zur Anwendungsgebiete und Risiken sagen? Danke :)

[@bioixi]

Ist notiert!