(Eng sub) Cell counting & Cell seeding 🔬🧬

[@25도발]

정말 기본적인 실험과정의 일부로 생각하실분들도 많겠지만 진심으로 과정하나하나를 스스로 점검하시며 고뇌하신 흔적이 그대로 영상에 남아있는것 같아 뭉클합니다ㅜ 진심으로 응원합니다!

[@hyejulee7072]

세상에 이런 부분까지 알아주시다니 감동인걸요 ,, ♥ !!!!!! 시청해주셔서 감사합니다 응원해주셔서 감사합니다 !!!

[@Angel96Butterfly]

I love your channel! You have clear steps written and I understood them easily! This really helps with my cell culturing procedures thank you so so much 🤍 your editing and video recorded is so aesthetically pleasing too! keep it up 😍

[@hyejulee7072]

Thank you for your comments ♥ I hope my video will be helpful for your research. Luv U !!! ,

[@JYOtiRaNJanMANgaRaj]

Thank you so much 🙏🙏

[@alfredogonzalez8735]

Your media looks a lil alkaline.

[@yeonju00]

혹시 cell harvest 하는 과정도 올려주실 수 있으실까요,,??

[@nounou_k]

원래 기기 분석을 하다가 갑자기 미생물, 셀 실험에 참여하게 되어서 걱정이 많았는데 공부에 도움이 많이 됐어요!! 너무 좋은 영상 감사합니다 ㅠㅠ

[@윤성현-w3v]

교보제로 사용해도 될만큼 자세하네요 ㅋㅋㅋ 매일하는 실험을 유튜브로 보니까 신기해요 ㅋㅋㅋ

[@hyejulee7072]

요즘 후배한테 인수인계 하는 시기인데 "내 영상 보고 공부해와 ~~!!" 이렇게 공부시켜요 ㅎㅎㅎㅎ ㅎ 영상을 만들어두니 엄청 편하더라구요 🥳

[@윤성현-w3v]

@@hyejulee7072 인수인계중이시군요 ㅋㅋㅋㅋ 저는 외국에서 연구하고있어서 외국학생들에게도 보여줘야겠어요 ㅋㅋㅋㅋ 대학생들이 실험 실습오는데 의대학생들 이니까 기본적인 피펫 사용법같은 룰같은것을 모를때가 있더라구요ㅋㅋ 말로 설명하는것 보다 한번 보는게 더좋을것 같아요

[@rajnijain7806]

Hii I am having a doubt regarding, as live cells= 980000 this value is for 1 ml but you have sample volume 10 ml so total no. Of cells must be 980000*10= 9800000 in 10 ml. Or 9.8*10^5 is the total cell count for 10 ml cell suspension?

[@romitkumarsubba4138]

is there any simple process to know the confluency of the cells? i always get wrong in judging confluency in my lab? we donot count cells for subseeding, we just watch the confluency to be between 70-80% and then subseed it to 20%, is it right process?

[@mariaantoniacabralmonteiro6769]

Wish someone could answer this

[@alfredogonzalez8735]

Its kinda subjective imo

[@hyejulee7072]

Different labs have different protocols, so there are various methods. I think the reason for determining the appropriate number of cells per well and counting cells is to ensure consistency when comparing the differences in efficacy of substance treatments.

[@gloria636]

kudos to your effort! sharing this video with my student

[@금더기]

정말 감사해요 ㅠㅠ

[@hyejulee7072]

시청해주셔서 감사합니다 ♥

[@Zahra-ve7vu]

thank you for the video, why do you decide to resuspent the cell pellet in 10ml media? will it affecting the calculation if i use different amount of media to suspensing the cell pellet?

[@DrHaywheezie_Neurotutes]

I also have this question. Because in my lab I usually resuspend in 1mL, if I want to plate in larger plates and not like the 96 well plate. what determines the volume of medium to resuspend the cells after centrifugation. Also I like counting the cells just before centrifugation. Does this affect anything?

[@eugeneroh2663]

저는 세포가 자꾸 중간에만 뭉쳐서 고민이였는데 한번 바닥에 놓고 저렇게 흔들어봐야겠어요 ㅎㅎ

[@cactoogi1]

혹시 떠서 자라는 세포도 영상으로 만들어 주실 수 있으실지요?

[@hyejulee7072]

제가 다음에 키울 기회가 된다면 ,, 시도해보겠습니다 !!! 시청해주셔서 감사합니다 !!

[@snehaldesai4423]

Thanks for easy explanation

[@samto8425]

Thank you so much!!!

[@sohamomeni6181]

amazing, thanks a lot!!!!!!❤❤❤❤

[@나융-w6b]

선생님께서는 seeding용 plate와 culture용 plate를 따로 만들어서 실험하시나요? 아니면 seeding하고 남은 cell을 culture하시나요?

[@hyejulee7072]

Culture용 dish (maintain dish) 는 고정으로 계속 Culture 를 하고 seeding이 필요한 경우에는 subculture 하고 남은 cell 을 이용하여 seeding을 하고 있습니다 !

[@독립만세-l1b]

혹시 6well할때 왜 seeding solution에 7wellsx2ml인가요! 6wellx2ml아닌가요?

[@아로는고양이야]

pipetting하면서 loss 생길수도 있고.. 엑스트라로 조금 더 만들어줘요

[@꾸기-e1j]

안녕하세요 계산식을 보다가 이해가 가지 않아서요 1. 9.8x10^5cells/ml:10ML=1x10^4cells/100ul:xML 따라서 xML=((1x10^4cells/100ul)/ (9.8x10^5cells/ml))x10ml이 아닌가요? 어디부분에서 잘못한건지 답은 틀리는데 어떻게 이해해야할지 모르겠습니다. 비례식을 썼는데 10ML 이 어디로 간건지.. 헷갈립니다. 그리고 뒤에 6well seeding 과정 설명에 100well 필요한 cell 이라고 적어주셨는데 7well 기준 필요한 cell 양을 잘못 적으신건지 궁금합니다.

[@Apricity03]

저도 이해안돼요 혹시 이해됬나오?

[@꾸기-e1j]

@@Apricity03 아니요 답변 기다리고 있습니다

[@hyejulee7072]

답변이 늦어서 죄송합니다. 영상을 검토해보았는데 제가 잘못 표기한 것 같습니다. Cell suspension 10 mL 중 Live cell 1. 9.8x10^5 cells/mL 이라서 표기가 (9.8x10^5 cells/mL) x 10 이 맞습니다. 비례식을 정정하자면, (9.8x10^5 cells) x 10 : 10 mL = 100 (필요한 well 수)x (1x10^4 cells) (well 당 필요한 cell 수) : X mL (Cell suspension 10 mL 중 필요한 cell 양) 10 x 100 x 10^4 = (9.8x10^5) x 10 x X mL X mL = 10 x 100 x 10^4 / (9.8x10^5) x 10 = 1.02040816 mL 입니다 ! 혼란은 드려서 죄송합니다 ㅠㅠ

[@hyejulee7072]

평소에 seeding을 할 때에는 아래와 같이 비례식을 축약해서 사용하는 게 편할거예요. Cell suspension 중 필요한 cell 양 (mL) = (well 당 cell 수) x (seeding 할 well 수) / (Cell suspension 중 Live cell 수) X mL = (1 x 10^4 cells) x 100 wells / 9.8x10^5 cells = 1.02040816 mL

[@menekse3194]

thank youuuuu

[@spllifesciences]

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