[New Western blot 3/6] 단백질 전기영동하기(SDS-PAGE)

[@Yooooon-s9q]

감사합니다 선생님..! ㅠㅠ 석사과정 중인데 너무 큰 도움이 되는 영상입니다!! 좋은 영상 많이 올려주세용😊👍🏻👍🏻

[@대학원생인것]

부족한 영상에 따뜻한 댓글 달아주셔서 감사합니다 ㅠㅠ 더 노력하겠습니다. 혹시 급한 도움이 필요하시면, 언제든 메일 주세요. 성심껏 도와드리겠습니다. 좋은 밤 되세요 🥰

[@sunj4135]

잘 정리되어있어서 석사 쌩초보가 참고하기 너무너무 좋아요! 감사합니다! 다음편도 기다리구있겠습니다!

[@대학원생인것]

감사합니다..!! 한 몸 불살라서 빠르게 다음 편 만들어보겠습니다..!❤️‍🔥❤️‍🔥❤️‍🔥

[@riovv]

다음 편 기다립니다 😂 감사합니다 -대학원생-

[@대학원생인것]

감사합니다 😄 바쁘지만 조금씩 만들고 잇어요 ㅠㅠ

[@남가연-s3w]

요즘 웨스턴 때문에 너어무 골아픈데, 정리 잘 해주셔서 잘봤습니당! part3 존버합니다아ㅏ^^^^^^

[@대학원생인것]

감사합니다! 혹시 웨스턴 때문에 너무 힘드시다면 메일 주세요! 제가 도움될 수 있는대로 도와드리겠습니다! 파트 3 양이 방대해서 편집만 한달이 걸리네요 ㅠㅠ 금방 올릴게요 😁

[@euuuz3751]

3:55 2개 걸고 전압을 준 후 다시 건다는게 이해가 안가요ㅠㅠ그리고 이게 더 안전한 이유도 궁금해요! 항상 유익한 영상 올려주셔서 감사합니다!!!많이 도움받고 있어요ㅎㅎ

[@대학원생인것]

감사합니다 ㅎㅎ 저기서 2개 건다는 의미는, 원래는 탱크 1개당 젤 4개까지 걸수있는데, 젤 4개를 동시에 걸려고 하면 많이 번지다 보니, 탱크 2개를 써서 각각 젤을 2개씩 따로 걸라는 얘기였어요 ㅠㅠ 젤 4개를 동시에 하면 첫번째 젤은 이미 다 퍼져서 보이지도 않더라구요! ㅎㅎ

[@수수깡-c7s]

선생님 덕분에 잘 이해할 수 있었습니다 감사합니다! 질문이 있는데 저희 랩에서는 well에 단백질을 분주하기 전에 tip에 단백질이 들어있는 상태에서 buffer를 묻히고 (찍고) 분주하는데 그 이유가 뭘까요? 😢 다른 well에 잘못 분주했을때 도움이 되나요?

[@대학원생인것]

@@수수깡-c7s 안녕하세요 수수깡님! 잘 이해되셨다니 다행입니다. 제가 더 감사하네요 ☺️ Tip에 단백질이 든 상태에서 well이 아닌 빈 buffer 부분을 찍는 이유에 대해 물어보셨는데요. 단백질 샘플을 빨아들인 tip 바깥쪽에는 단백질이 버퍼와 함께 묻어있을 가능성이 높습니다. 이 상태로 well 위 버퍼 수면 쪽에 닿게 되면, 단백질이 퍼지면서 가라앉게 되고, 의도치 않게 양 옆 well에 일부 loading될 수 있습니다. 그 양은 물론 0.1-0.5 uL 정도로 미세해서 단백질 염색에는 안 보일 수 있으나, 항체를 사용해서 민감하게 관찰할 때는 밴드가 희미하게 관찰될 수 있습니다. 실수로 단백질이 흘러들어간 well이 negative control을 위한 well이라면 더욱 문제가 되겠죠. 그래서 well에 로딩하기 전, well 바깥쪽 buffer에 tip을 한번 찍어서 밖에 묻은 잉여 단백질을 없애고 깨끗한 상태에서 well에 넣어 분주하는 것이죠. 이렇게 empty space에 dipping 하여 단백질을 없애줄 수도 있고, 단백질을 빨아당긴 상태에서 마이크로파이펫 눈금을 올려 샘플을 팁 안쪽으로 끌어당긴 다음 2 step까지 분주하는 방법도 있습니다. 정답은 따로 없으니, 편한 방법을 선택해서 사용하시면 됩니다. 이해가 되셨을까요? 다른 궁금한 점은 없으신가요? 🥰

[@수수깡-c7s]

한방에 이해됐습니다!!! 친절하게 답변해주셔서 너무너무 감사합니다. 앞으로도 영상 잘 챙겨보겠습니다 감사합니다!!!🎉

[@대학원생인것]

@@수수깡-c7s 감사합니다 ㅎㅎ 좋은 하루 되세요 ☺️

[@쑤닝-z3p]

저 혹시 최종 진로가 뭔지 물어봐도 되나용..? 대학원..정말 힘든거같은데 정말 대단하신거 같아요!!

[@대학원생인것]

감사합니다 ㅎㅎ 저는 최종 목표는 대학 교수이지만... 요즘은 그냥 연구원도 끌리긴 해요 😊

[@urizipcrab]

마우스영상 보고 오게됐는데욤 ㅎㅎ 혹시 뭐 좀 여쭤봐도 될까욤!! 제가 비임상쪽으로 대학원 진학 예정인데..혹시.. 쥐를 극복 못하셔서 진로를 트시거나 극복하신 분들이 있으신가요?

[@대학원생인것]

안녕하세요 :) 안 그래도 저희 대학원에 진학하려는 학생들도 많이 물어보는 질문입니다. 논문에 쓸 실험에 쥐, 랫트, 햄스터 등을 사용하는 동물 실험이 필수는 아닙니다. 물론 동물실험이 포함된 논문을 높게 쳐주는 분위기인 것은 맞지만, 동물실험은 3R 원칙에 의해 꼭 필요한 경우가 아니라면 덜 실행될수록 좋은 분위기인 것도 맞습니다. 그렇게 필수가 아니기 때문에 동물실험 하나로 인해 진로를 트시는 분은 없습니다. 저희 연구실도 동물실험을 주로 하지만, 동물실험 한 번 없이 졸업하시는 분들도 계세요. 그리고 쥐를 싫어하시거나 해부, 수술 등 잔인한걸 못보시는 분들도 오시면 곧장 잘 하시더라구요 ㅋㅋㅋㅋ 극복 케이스가 더 많았던것 같습니다.

[@urizipcrab]

@@대학원생인것 성의 있는 답변 정말 감사합니다 ㅎㅎ 물어볼 곳이 마땅하지않았는데 정말 도움이 되었어욤 ㅎㅎ 안타깝게도 ..제가 갈 실험실은 주로 대부분 99%동물시험을 한다네요..그래도 말씀하신대오 저도 극복할 수 있겠거니..하고 지원합니다..! ㅜㅜ 하..정말 괜찮을 겁니다 저도….!

[@대학원생인것]

@@urizipcrab 아 그렇군요 ㅠㅠ 연구실 입학을 축하드리며 앞날에 성공이 가득하시길 바래요 ㅎㅎ 잘 극복하실 수 있으실 겁니다. 궁금한게 있으시면 언제든 물어보시구요. 그나저나 피를 잘 못 보시거나 잔인하다는 것에 거부감이 있으신 건가요? 아니면 동물을 죽이는 것에 거부감이 있으신가요?

[@urizipcrab]

@@대학원생인것 피나 잔인한 것보단…그냥 쥐를 만지는 것에 무서움을 느껴서요 ㅎㅎ 막 온몸을 탈 갓같은 상상도 들고.. 막 물 것같아요 ㅋㅋㅋㅋㅋ 오히려 피나 잔인한걸 보는 건 안타깝긴해도.. 만지는 것보단 괜찮아합니다..!!! 참..이상하죠 ㅜㅠㅋㅋㅋㅋ

[@대학원생인것]

@@urizipcrab 엇 여기 계시는 분들 대부분 처음에는 그러세요. 차라리 죽어있는 건 괜찮은데, 살아있는 걸 만지면 꿈틀대고 믈거 같고 그렇다고 하시더라구요. 하지만 쥐들도 알건 다 알더라구요. 잘 대해주면 주인임을 인식하고, 물지도 도망치지도 않고 손바닥 위에 잘 있거나 쓰다듬어주기까지 하는데, 험악하게 다루거나 위협을 가한다거나 겁을 먹으면 또 만만하게 보고 물더라구요 ㅠㅠ 참 작지만 사람이랑 비슷하긴 합니다 ㅋㅋ 참고로 쥐를 손으로 잡는 방법을 보정법이라고 하는데, 방법만 잘 익히시면 아무리 흉폭한 쥐라 하더라도 절대 물리지 않아요 ㅎㅎ 보정틀이라는 것도 있어서 심지어 처음부터 끝까지 쥐를 만지지 않고 실험도 가능하답니다 ㅋㅋ

[@happyzzinlipe]

안녕하세요! 원래 임상병리학과 재학하다가 지금은 의약분석과에서 랩실 도비가 되어있는 학부생입니다! 혹시 연대 대학원 같은 경우는 타학과 학생들도 받아주는 편인가요? 특대일 것 같진 않은데 특대면 혹시 직장과 병행이 가능한가요?🥺

[@대학원생인것]

저희 대학원에 물론 임상병리학과 출신이 대다수이긴 하지만, 생명학과, 생물학과, 화학과 등등 다양한 학과 출신분들이 많이 계세요. 물론 교수님들께서도 임상병리사, 수의사, 화학자, 의사 분들이 계시구요 😊 직장 병행을 하시는 분들을 보통 파트타임 대학원생이라고 부르는데, 뭐 풀타임 대학원생들과 일하는 위치만 다를뿐 별 큰 차이는 없습니다. 사실 저희가 부르기 편하자고 파트타임, 풀타임이라고 부르지만, 학교 기록상에는 그냥 다 같은 대학원생이니까요. 다만, 제가 알기로 파트타임 분들께서는 아무래도 학교에서 거리가 먼곳에 위치하시다 보니 교수님의 지원 및 교육을 온전히 받기에는 쉽지 않죠. 타학과 학생이라고 배척하는 것은 절대 없습니다. 오히려 저희 임상병리사들에게 없거나 필요한 지식을 가지고 계신 경우가 많아서 서로 지식을 공유하고 화합하려 노력하는 편입니다. 의약분석과시라면, 저희에게 없는 물리, 화학, 약학쪽 지식이 뛰어나시겠군요. 정말 큰 강점을 가지고 계시는 겁니다. 👍👏👏 연대 임상병리학과 대학원은 타과에 대한 거리감 같은 것은 걱정하지 않으셔도 됩니다.

[@대학원생인것]

다만 현재 교수님들 연령대가 높으시다 보니, 7분의 교수님 중 2분이 은퇴 직전이십니다. 새로운 교수님들께서 들어오셨지만, 아직 연구실 준비 중이시구요. 제가 다른 연구실에 대해 얘기하기가 조심스러워서 여기까지만 하겠습니다. 만약 알아보신다면, 교수님 정년이 얼마 남으셨는지, 수행중인 과제가 있어 연구 진척이 가능한지, 인수인계와 교육을 해주실 선배가 계신지 등등을 잘 알아보셔서 후회없는 선택을 하셨으면 합니다. 응원합니다!! 🫡

[@happyzzinlipe]

정말 친절하고 자세한 답변 감사합니다! 계속 대학원에 대한 꿈이 있기도 하고 랩실에서 이번에 하던 세포배양 쪽 영상을 찾아보다가 여기까지 왔는데 이렇게 빠른 시간 내에 자세하게 답변해주실 줄 몰랐습니다🥹 이제 연휴 시작인데 안전 조심하고 행복한 하루들만 가득하게 보내시길 바라며 자주 복습하러 놀러 오겠습니다! 시간 나실 때 업로드 해주세요!!ㅎㅎ🫶 진심으로 감사합니다! 아 혹시 대학원 들어가는 과정은 많이 힘들까요?!🥲 제가 만약 대학원을 간다면 지금은 초대졸 출신이라 편입을 한 뒤에 가야하는데 이게 연고대같은 유명 대학교의 대학원에서는 걸림돌이 될까 싶어서요ㅠ

[@대학원생인것]

@@happyzzinlipe 음 이 부분에 대한 답변은 제가 개인적으로 드려야 할 것 같은데, 혹시 실례가 안 된다면 [e-mail]로 메일 주실 수 있으신가요? 거기서 자세히 답변과 도움 드리겠습니다

[@대학원생인것]

@@happyzzinlipe 영상 봐주셔서 감사드리고, 찐님도 행복하고 좋은 연휴 보내세요 🙇😆 영상은 잘 업로드해보겠습니다!

[@곽명경]

에러코드 E9이 뜨는데 이건 뭐가 잘못된걸까요? ㅠㅠ

[@대학원생인것]

@@곽명경 보통 버퍼 문제이거나 단선 문제일 가능성이 높습니다. E9은 bio-rad 사에서는 change in load resistance 문제라고 얘기하는데, 제대로 전기가 흘러가지 않아 voltage 드롭 현상을 보이는 거죠. 새로운 탱크와 뚜껑을 찾아서 결합해보시거나, 새로운 버퍼로 교체해보세요. 그럼에도 똑같은 에러가 뜬다면 파워팩(전압 설정하는 장비) 문제일 가능성이 높습니다.

[@곽명경]

@@대학원생인것 답변 감사합니다. 구글링해도 E9에 대한 정보를 저는 못찾았는데, 어디서 찾으셨나요?

[@대학원생인것]

@@곽명경 저는 'biorad powerpac basic'를 구글에 검색해서 data sheet를 찾은 후, 내용 중 ctrl+f로 E9에 대해 찾았습니다!

[@곽명경]

@@대학원생인것 감사합니다!

[@대학원생인것]

@@곽명경 감사합니다 ㅎㅎ 좋은 주말 되세요 🥰

[@Gamchaechae]

궁금한게있습니다! 혹시 대학원 등록금은 어떻게 하고있나요?!

[@대학원생인것]

대학원 등록금(600 정도)은 장학금+과외 알바+부모님 지원, 부끄럽지만 이렇게 해결하고 있습니다. 😄 혹시 이게 궁금하셨던 걸까요? 아니면 연세대학교 대학원 등록금 납부 절차가 궁금하셨던 걸까요...?

[@Gamchaechae]

답변이 늦어 죄송해요ㅠㅠ 전자입니다! 장학금에다 알바까지,,(부끄러운 게 아니라 대단하세요!) 영상 자주 보러 오겠습니다. 😄

[@대학원생인것]

@@Gamchaechae 감사합니다 ㅎㅎ 🙇😄