Détection des protéines spécifiques par WESTERN BLOT : Principe et Protocole | Biochimie Facile

[@fellaabdoun4315]

Je vous félicite pour l'excellente qualité de vos vidéos et de votre présentation orale très claire et explicite. Merci beaucoup.

[@BiochimieFacile]

Merci beaucoup pour votre commentaire ça me fait plaisir ☺️

[@miguelkelvinikamba1716]

Merci beaucoup ! Qui que vous soyez , c'est vraiment très simplement expliqué

[@Ahmed14928]

Merci beaucoup, ça m'a beaucoup aidé pour les révisions

[@celiasa419]

Merci beaucoup pour cette simple et magnifique explication ❤❤❤

[@AslowFast]

Tres bonne vidéo, bien structurée, bien imaginée, elle m’a beaucoup aidée ! Merci beaucoup !

[@BiochimieFacile]

Merci ☺️

[@henrihuynh9720]

Un grand merci, une vidéo très pédagogique

[@BiochimieFacile]

Merci beaucoup 😊

[@cyndelep.-m.5184]

Vous êtes vraiment super ! ❤❤❤ MERCII

[@soldesderlandedelfils2381]

Merci beaucoup pour cette vidéo

[@khadija2111]

qui que vous soyez , je vous en suis éperdument reconnaissante.

[@ImaneBoulal]

Vos vidéos sont très utiles ❤❤❤😊

[@BiochimieFacile]

Merci beaucoup 😊

[@ImaneBoulal]

Merci à vous 🤗

[@بالعلمنحيا-ل7و]

merçi bouceaup j'ai compris toutes les etapes de cette technique💚

[@BiochimieFacile]

Génial ! Très contente que la vidéo vous a été utile ☺ n'hésitez pas à la partager avec vos amis biochimistes 😀 merci beaucoup et bon courage

[@iammnl5488]

VIDEO PARFAITE MERCI ❤❤❤❤

[@amanimegherbi8845]

Merci pour votre explication

[@Amsebrid]

Je vous remercie infiniment

[@BiochimieFacile]

Avec plaisir :)

[@patrickgranier5425]

Bonjour, merci pour cette video tres claire. Continuez comme cela. Patrick

[@BiochimieFacile]

Merci beaucoup pour votre commentaire !

[@alainnoutcho7491]

Merci beaucoup pour la vidéo. Est ce que vous pouvez faire la réalisation même de ce que vous expliquez au laboratoire svp

[@nihelhammoumi6456]

je Vous remercie

[@BiochimieFacile]

Avec plaisir ☺️

[@nicolaslhomme2117]

Merci

[@cookwith-Amel]

🔴🔴 Combien le temps de diagnostic par cette technique pour "la taxoplasmose" svvpppp ??

[@magloireaureagbomakounzo5613]

Merci pour votre vidéo cela m'aide beaucoup dans ma formation de Bio-informatique. Ma question est de savoir pourquoi l'anticorps primaire n'est pas en même temps couplé au fluorophore pour détecter la protéine d'intérêt .Merci

[@annaaakat3002]

j'ai la meme question

[@justine7325]

Bonjour, merci pour toutes les vidéos ! Petite question : comment se fait-il que parfois, on observe une coloration bleu continue au niveau de certains puits ? Je vous remercie par avance pour votre réponse !

[@BiochimieFacile]

Bonjour merci pour votre commentaire 😍 Cela peut être dû à une trop grande quantité de protéines déposées sur le gel. En général pour avoir de belles bandes en coloration Coomassie il faut déposer entre 2 et 5 microgrammes de protéine par piste.

[@justine7325]

D'accord, je vous remercie pour votre réponse et je vous souhaite une très bonne continuation ! 😊

[@BiochimieFacile]

@@justine7325 merci beaucoup, à vous aussi

[@eve2720]

Bonjour, n'est-il pas possible de coupler directement l'anticorps primaire avec un produit luminescent ? Je ne comprends pas bien l'intérêt de l'anticorps secondaire.

[@BiochimieFacile]

Alors oui c’est possible pour certains anti-corps. Par exemple j’utilise régulièrement l’anticorps anti-His couplé à la HRP qui permet de détecter le tag hexahistidine des protéines recombinantes. Cependant il n’est pas possible de coupler tous les anticorps avec des enzymes permettant la révélation, d’où la nécessité d’avoir un anticorps secondaire.

[@eve2720]

@@BiochimieFacile super merci beaucoup !!

[@victorlecomte4501]

Bonjour, je n'arrive pas à pourquoi la bsa ou le lait va entraîner le blocage des autres protéines qui ne se trouvent pas à 50 kda😊

[@BiochimieFacile]

Bonjour, En fait la BSA ou le lait (contenant les protéines de lait) sont utilisés pour bloquer (c'est à dire à occuper) les sites non spécifiques de fixation des protéines sur la membrane. En effet la membrane utilisée en western blot est très sensible pour lier des protéines. Or, les anticorps qu'on utilise pour la révélation sont également des protéines. Ainsi en bloquant les sites non occupés sur la membrane par la BSA ou les protéines de lait, on empêche les anticorps de se fixer ailleurs que sur notre protéine d'intérêt. Maintenant en ce qui concerne la taille des protéines, celle-ci ne joue aucun rôle lors du blocage et de la revelation car les protéines sont séparées par migration sur gel sds-page. La membrane ne sépare pas les protéines en fonction de la taille, n'importe quelle protéine peut se fixer sur n'importe quel site non occupé sur la membrane. C'est pourquoi il faut toujours manipuler la membrane avec des gants et avec une pince pour éviter la contamination par la keratine par exemple 😊 J'espère que mes explications ne sont pas trop confuses. N'hésite pas si tu as d'autres questions 😊

[@victorlecomte4501]

@@BiochimieFacile merci beaucoup de votre réponse je vais relire mon cours mais deja votre vidéo m'a beaucoup aidé car c est pas facile de comprendre le western southern et Northern blot 😊

[@BiochimieFacile]

@@victorlecomte4501 bon courage et n'hésite pas à me redemander si qqch n'est pas clair 😊

[@بالعلمنحيا-ل7و]

concernant le transfert liquide quel est la nature de liquide?et merçi

[@BiochimieFacile]

Le tampon de transfert contient : du Tris, de la glycine, du SDS et soit du méthanol ou de l'éthanol (le méthanol étant de moins en moins utilisé car toxique).

[@YvesOctaveDurantDezali]

Vidéo parfaite mais possible de faire un exemple mais au laboratoire.🙏🙏

[@biotechnologie2548]

❤️

[@Zouzou27477]

merci, cela m'a aider à comprendre la technique, juste vous avez inversé les pôles de migration anode cathode.

[@arianegraziani3583]

Non elle a pas inversé, pour le western blot l'anode est bien le pole positif et pour une pile le negatif(je ne saurais pas te dire pourquoi par contre, j'ai juste un cours là dessus c tout😅).

[@Zouzou27477]

@@arianegraziani3583 merci pour ta réponse, toujours tout faire pour plus mélanger nos cerveaux XD

[@d.na_dy.a5521]

Mrc bq

[@xu9712]

La vidéo est pas mal

[@nassimaguenoun5785]

Cathode c est le pole positive pas négative!!! Cations +++

[@JulienKOUM]

Merci

[@BiochimieFacile]

Merci à vous ☺️