PCR、RT PCR、qPCR、qRT PCR簡介與如何應用於病毒的檢測

[@sunday2341]

謝謝蔡老師，清晰易懂

[@applejoe099]

感謝老師

[@ntu_tiger]

講得真好!

[@landcruiser6652]

15:43 好高亢 建議重播

[@邱鑽鑽]

老師講得很好! 馬上懂了

[@kash2433]

謝謝老師分享❤但是真的大部分的文獻都不會講RT-PCR的所需要的溫度值和PCR不一樣😢我後來是從國外的影集找到的😂

[@landcruiser6652]

這些研究相關資料建議都用英文搜尋 你會發現另外一個豐富的世界

[@rogeliokg]

U質 推

[@必須通過]

老師講超好! 感覺會是今年考題

[@user-xx3cs5ig2v]

預言家在這！！果然今年考了😂😂

[@user-fb9vq4mu9k]

老師謝謝

[@那個傑]

110指考考題 老師太強了

[@hungtsai418]

講解很清楚 謝謝

[@吳阿米-p4s]

想敲碗HRM-qPCR

[@yyw7763]

超推 完美解說

[@Tear_Halibel]

讲的超级好，感谢老师！

[@henry041347]

感謝蔡老師，受用不盡

[@Jun-tz4pj]

講解得超清楚

[@xinyuzhang6529]

非常好的科普视频！

[@_niiianpu]

老師請問為什麼rna病毒要先反轉錄成dna才可以做pcr呢？ rna本身就是雙股不必解螺旋，rna聚合酶作用時也不用引子，感覺比起dna更方便大量複製呀？

[@kash2433]

RNA本身是單股螺旋喔，雖然他可能會因為自己身上的序列互補而自我配對成hair loop。反轉是因為RNA本身因為結構比較不穩定，容易被降解，但DNA是雙股就比較穩定 我自己的理解是人體可行的方式，在體外試驗時不一定可行，人體本身就是大型培養箱，在外則可能需要反其道而行，好比如中心教條DNA>>RNA>>Protein，在測驗某個病毒的蛋白或是RNA，我們最終的定序對象則為DNA（因此蛋白就必須lysis,RNA就必須reverse成 cDNA)

[@janmauuoskkshhh2346]

太嗯了

[@yglin8785]

凌越説他們有快篩試劑。

[@derekhsieh6193]

老師，請問那個螢光是來自TaqMan Probe 中5'端的Reporter of Fluorescence嗎?

[@jamesshie6497]

幫忙回覆，非也，影片中該螢光特性為SYBR green，是泛核酸染劑，缺點是背景值較高(專一性較差，Ct值的天花板約35)，Taqman probe分兩部分，probe 是針對特定目標序列設計，專一性高，在此專一設計的probe後面也接螢光物質，當PCR反應進行時，會黏附在單股DNA上，聚合酶合成新核柑酸時，會將此probe水解，並釋放出螢光，檢驗新冠肺炎必須是taqman的系統才可 (Ct值的天花板為40)

[@jhl7637]

推

[@kirahuang8007]

thx for this clear explanation i appreciate this and also u r so funny hahahahaah

[@儲佳郁-f5x]

老師，我想請問： 檢驗出偽陽性的事件，是否是因為儀器誤判，抑或人為採檢檢體上有不當之處而造成之？還是有其他的原因…… 🤕

[@biotennis1118]

我分享一下 個人認為這是特異性的問題 特異性高的檢驗方法就不容易出錯 因為只會和真正的病毒檢體起反應 特異性低的檢驗方法就有可能會出錯 至於詳細原因其中一種說法是當反應物濃度夠高 就可能使原本不會起反應的情況發生 所以不管任何一種檢驗方式都有機會出錯 機率低或高而已

[@蔡建弘]

都有可能，而且當一個檢驗試劑來，醫檢師必須去驗證試劑說明書上的敏感度或特異度。 - 1.採樣部位是否合格(是否有沾血、碎塊來判定允不允收)、 2.運送時效溫度有沒有做控管 3.採檢容器是否合格 4.採檢前後是否有服藥 5.採檢時的病程 6.前處理是否染污 7.機台管路是否有做日、月、年保養 8.試劑的品質是否OK都會影響(試劑是開封的狀態，就會受環境溫溼度或蒸發程度影響品質) 9.不同機台做同樣的檢驗項目也必須做相關性 10.等等等好幾十項因素都會影響檢驗的準確度 - 總之，很多很多因素會造成偽陽/陰性

[@chengchi9777]

另外RNA病毒的突變頻率相當高，若是你的primer與原病毒株不符，病毒產生多次突變後也可能被測不出來，這就不是儀器誤判的誤差了，所以我們也要去分析他的突變病毒株

[@張人義]

💪💪💪🙏🙏🙏

[@napekim6576]

請問老師，若不考慮採樣與執行， 這PCR單純量測偽陰/偽陽之比率， 有像陳指揮官估計的都是5％嗎？ 有測成沒有，沒有測成有分別是多少？